کیت Gel/PCR-Max-Extract دنازیست؛ استخراج اسیدهای نوکلئیک از ژل و PCR

کیت دو منظوره استخراج از ژل و خالص‌سازی PCR دنازیست با نام تجاری جدید DENAzist Gel/PCR-Max-Extract Kit جدیدترین محصول دنازیست است که به عنوان جایگزین ارتقاء یافته برای دو محصول قبلی (کیت Gel-Max-Extract و کیت PCR-Max-Clean دنازست) طراحی و تولید شده است.

این کیت با فرمولاسیون بهینه شده، یک راه‌حل جامع و اقتصادی است که به شما پژوهشگران گرامی اجازه می‌دهد با خرید یک کیت، هر دو فرآیند بازیابی اسید نوکلئیک از ژل آگارز و خالص‌سازی محصول PCR را با بالاترین راندمان و کیفیت انجام دهند.

با استفاده از کیت Gel/PCR-Max-Extract، شما می‌توانید قطعات DNA را از ژل‌های آگارز (با نقطه ذوب استاندارد یا پایین) در بافرهای TAE یا TBE استخراج کنید و یا مستقیماً محصولات واکنش PCR را از آنزیم‌ها، پرایمرها، دایمرها و نمک‌های اضافی پاکسازی نمایید.

این کیت در دو بسته‌بندی ۲۵ واکنشی و ۵۰ واکنشی قابل سفارش است.

چرا کیت دو منظوره ژل و PCR دنازیست؟ (ویژگی‌ها و مزایا)

• صرفه اقتصادی و مدیریت بهتر: بی‌نیاز شدن از خرید دو کیت مجزا؛ با یک کیت تمامی نیازهای آزمایشات پایین‌دستی خود را پوشش دهید.
• انعطاف‌پذیری بالا: قابلیت استفاده برای استخراج DNA از ژل آگارز و یا پاکسازی مستقیم محلول PCR.
• حذف ناخالصی‌ها: حذف کامل نوکلئوتیدها، آنزیم‌ها (پلیمراز یا آنزیم‌های برشی)، نمک‌ها و قطعات کوچک DNA.
• سرعت بالا: پروتکل سریع و ساده (کمتر از ۲۰ دقیقه).
• کارایی بالا (High Yield): بازدهی عالی در بازیابی DNA با استفاده از ستون‌های سیلیکایی ارتقا یافته.

نتایج و نمونه‌های بدست آمده

در تصاویر زیر کارایی محصول در بازیابی DNA از ژل آگارز و همچنین خالص‌سازی واکنش PCR قابل مشاهده است:

تصویر نمونه DNA استخراج شده از ژل توسط کیت استخراج از ژل دنازیست در مقایسه با همان مقدار نمونه (بدون استخراج از ژل)

تصویر نمونه DNA استخراج شده از ژل توسط کیت استخراج از ژل آگارز در مقایسه با همان مقدار نمونه (بدون استخراج از ژل)

باند دوم از سمت چپ: محصول PCR قبل از خالص‌سازی (حاوی دایمر و اسمیر) | دو باند سمت راست: باند استخراج شده پس از استفاده از کیت (حذف دایمر و توالی‌های کوتاه)

کاربردهای DNA خالص‌سازی شده

نمونه‌های DNA به دست آمده توسط کیت دارای خلوص بسیار بالایی هستند و برای حساس‌ترین کاربردهای زیست‌شناسی مولکولی مناسب می‌باشند، از جمله:

• تعیین توالی (Sanger Sequencing & NGS)
• کلونینگ و ساب‌کلونینگ پلازمید (Plasmid Subcloning)
• ترانسفکشن (Transfection) به سلول‌های یوکاریوتی
• رونوشت‌برداری در شرایط خارج سلولی (In-vitro Transcription)
• ریزتزریق (Microinjection)
• هضم آنزیمی (Restriction Enzyme Digestion)
• واکنش‌های PCR و qPCR مجدد

کیت استخراج از ژل دنازیست با نام تجاری جدید DENAzist Gel-Max-Extract Kit جهت جداسازی و بازیابی سریع و ساده اسیدهای نوکلئیک از ژل آگارز

محتویات و اجزای کیت استخراج اسیدهای نوکلئیک از ژل و PCR دنازیست

این کیت شامل بافرهای اختصاصی است که برای هر دو کاربرد (استخراج از ژل و ریکاوری PCR) بهینه شده‌اند:

• محلول GR1 (Binding Buffer): بافر اتصال دهنده.
  نکته: این بافر هم برای حل کردن ژل (در دمای ۵۰-۶۵ درجه) و هم برای مخلوط شدن با محصول PCR (با نسبت ۳ به ۱) استفاده می‌شود.
• محلول GR2 (Wash Buffer): بافر شستشو جهت حذف نمک‌ها و ناخالصی‌ها.
  توجه: قبل از اولین استفاده، طبق دستورالعمل روی بطری، به آن اتانول (۹۶ تا ۱۰۰ درصد) اضافه کنید.
• محلول GR3 (Elution Buffer): بافر آزادسازی DNA خالص از ستون.
• ستون‌های فیلتراسیون (Spin Columns): ستون‌های سیلیکایی با ظرفیت اتصال بالا به همراه لوله‌های جمع‌کننده.

خلاصه روش کار با کیت استخراج اسیدهای نوکلئیک از ژل و PCR دنازیست

1. آماده‌سازی نمونه:
   • برای استخراج از ژل: قطعه ژل را برش داده و با نسبت ۳۰۰ میکرولیتر بافر GR1 به ازای هر ۱۰۰ میلی‌گرم ژل، در دمای ۵۰ تا ۶۵ درجه سانتی‌گراد حل کنید.
   • برای محصول PCR: به ازای هر حجم از محصول PCR، سه برابر حجم از بافر GR1 اضافه کرده و مخلوط کنید (مثلا ۳۰ میکرولیتر بافر برای ۱۰ میکرولیتر محصول PCR).
2. مرحلهٔ اتصال (Binding): مخلوط را به ستون منتقل کرده و سانتریفیوژ کنید.
3. مرحلهٔ شستشو (Washing): ستون را طی دو مرحله با بافر GR2 (حاوی اتانول) شستشو دهید.
4. مرحلهٔ خشک کردن: ستون را سانتریفیوژ کنید تا اتانول کاملا حذف شود.
5. مرحلهٔ بازیابی (Elution) اسیدهای نوکلئیک: بافر GR3 (یا آب بدون نوکلئاز) را به مرکز ستون اضافه کرده و پس از ۱ دقیقه مکث، سانتریفیوژ کنید تا DNA خالص جمع‌آوری شود.

سایر محلول‌هایی که برای استفاده از این کیت نیاز دارید

محلول عمومی که برای استفاده از کیت استخراج از ژل و PCR دنازیست نیاز دارید، عبارتست از:

• اتانول (Ethanol)

DENAzist Gel/PCR-Max-Extract Kit is a highly efficient combined solution replacing the previous separate Gel Extraction and PCR Cleanup kits. It is designed for recovering nucleic acids from standard or low-melting agarose gels (TAE/TBE) as well as purifying PCR products. The recovered DNA is suitable for sensitive downstream applications such as Sequencing, Transfection, In vitro transcription, and Cloning.

• S-1050-25 for 25 applications
• S-1050-50 for 50 applications