کیت سنتز cDNA با پرایمرهای oligo-dT و Random Hexamer

کیت سنتز cDNA با پرایمرهای oligo-dT و Random Hexamer دنازیست (Reverse transcription kit with thermostable M-MLV, oligo-dT & random hexamer) دارای آنزیم reverse transcriptase فعال در دمای بالای دنازیست آسیا و پرایمرهای رندم هگزامر و الیگو دی تی برای رونوشت برداری معکوس و تهیه cDNA از انواع مولکول‌های کوتاه و بلند و با ساختارهای ساده و پیچیده RNA طراحی شده است. این آنزیم تنها در ۱۰ دقیقه قادر به رونوشت برداری معکوس از مولکولهای RNA با طول ۱۰ هزار باز و بیشتر می‌باشد. دمای ۵۵ درجه واکنش امکان آن را فراهم می‌سازد تا مولکولهای RNA با ساختار پیچیده و دارای ترکیب غنی از GC نیز بتوانند به راحتی مورد رونوشت برداری قرار بگیرند.

آزمایش‌ها و تست‌های کنترل کیفی صورت گرفته توسط بخش تحقیق و توسعه شرکت دنازیست آسیا نشان می‌دهد که انواع مولکول‌های RNA؛ از جمله کد کننده پروتئین، غیر کد کننده بلند (long noncoding RNAs) و مولکول‌های با تعداد کم رونوشت نیز با استفاده از این آنزیم قابلیت تبدیل به cDNA و سپس تکثیر توسط conventional PCR یا quantitative PCR را دارا می‌باشند.

کیت سنتز cDNA با پرایمرهای oligo-dT و رندوم هگزامر (random hexamer) دنازیست حاوی تمام محلول‌های مورد نیاز برای رونویسی معکوس الگوهای RNA با استفاده از پرایمرهای oligo-dT و رندوم هگزامر (random hexamer) است. ترانس کریپتاز معکوس مقاوم به حرارت دنازیست، یک واریانت مهندسی ژنتیک شده و مقاوم به حرارت از ترانس کریپتاز معکوس M-MLV می‌باشد. جایگاه‌های جهش جدید در این آنزیم، پایداری حرارتی، نیمه‌عمر، قدرت پیش‌روندگی (پروسسیویتی) و مقاومت آن به مهارکننده‌ها را به طور قابل توجهی افزایش داده‌اند. این کیت همچنین می‌تواند برای رونویسی معکوس مقادیر بسیار کم Total RNA یا mRNA استفاده شود. علاوه بر این، بافر واکنش بهینه‌سازی شده، سازگاری بالایی با آزمایش‌های PCR و qPCR بعدی دارد.

cDNA رشته اول تولید شده توسط این آنزیم به راحتی می‌تواند در واکنش‌های PCR و qPCR بعدی و همچنین برای تولید کتابخانه‌های cDNA تمام‌قد (full-length) مورد استفاده قرار گیرد. دمای بالای واکنش (۵۵ درجه سانتی‌گراد) برای این آنزیم، امکان رونویسی معکوس الگوهای RNA غنی از GC با ساختارهای ثانویه پیچیده را فراهم می‌کند.

این کیت در دو حجم ۲۵ و ۵۰ واکنشی ارائه می‌شود.

اجزای کیت سنتز cDNA با پرایمرهای oligo-dT‌ و  Random Hexamer:

• آنزیم Thermostable M-MLV Reverse Transcriptase
• بافر واکنش 5x
• محلول 0.1 مولار DTT
• مخلوط dNTPs (هر باز با غلظت ۱۰ میلی مولار)
• پرایمر oligo-dT (با غلظت ۵۰ میکرومولار)
• پرایمر random hexamer (با غلظت ۵۰ میکرومولار)
• آب فاقد ریبونوکلئاز (DEPC-treated)

به آنزیم RT یا کیت ساخت cDNA همراه با یک نوع پرایمر نیاز دارید؟

• آنزیم RT (رونوشت بردار معکوس) فعال در دمای بالا
• کیت سنتز cDNA با پرایمر اولیگو dT
  اجزای کیت: آنزیم RT؛ مخلوط dNTPs؛ پرایمر Oligo dT؛ آب فاقد ریبونوکلئاز.
• کیت سنتز cDNA با پرایمر رندم هگزامر
  اجزای کیت: آنزیم RT؛ مخلوط dNTPs؛ پرایمر Random Hexamer؛ آب فاقد ریبونوکلئاز.