محیط کشت باکتری سوپر براث

محیط کشت باکتری سوپر براث دنازیست برای کشت سویه‌های اشریشیا کولای‌ ‌دارای پلاسمیدهای با کپی بالا استفاده می‌شود. تریپتون و عصاره مخمر در این محیط منبع مواد غذایی و فاکتورهای رشد هستند. گلیسرول نیز منبع کربوهیدرات است. پتاسیم فسفات موجود در این محیط از اسیدی شدن محیط در حین رشد باکتری ممانعت به وجود می‌آورد.

محیط کشت سوپر براث شامل مقادیر بیشتری نسبت به محیط کشت‌های معمولی مانند LB Broth است و به همین دلیل، باکتری‌ها در این محیط می‌توانند به تراکم سلولی بسیار بالاتری دست یابند. این ویژگی باعث شده که سوپر براث برای تولید مقادیر زیاد پروتئین بازتولید شده یا تکثیر پلاسمید در مقیاس بزرگ مورد استفاده قرار گیرد. علاوه بر این، استفاده از سوپر براث در برخی موارد می‌تواند به کاهش زمان رشد باکتریایی کمک کند، که این امر برای پروژه‌های تحقیقاتی که نیاز به رشد سریع سلول‌ها دارند، بسیار مفید است. با این حال، به دلیل غلظت بالای مواد مغذی، ممکن است شرایط اکسیژن‌رسانی و تهویه در فرایند کشت باکتریایی باید با دقت بیشتری کنترل شود.

کاربردهای محیط کشت سوپر براث دنازیست

محیط کشت سوپر براث (Super Broth) در زیست‌شناسی مولکولی و بیوتکنولوژی کاربردهای متعددی دارد، به ویژه در زمینه‌هایی که نیاز به رشد سریع و تولید بالای باکتری‌ها است. برخی از کاربردهای اصلی آن شامل: تکثیر پلاسمید: به دلیل غنی بودن از مواد مغذی، محیطی مناسب برای تکثیر پلاسمیدها است. این امر برای تولید مقادیر زیاد DNA پلاسمیدی که در کلون‌سازی و مهندسی ژنتیک استفاده می‌شود، حیاتی است. بررسی بیان ژن‌ها و تولید پروتئین‌ها: از آنجایی که سوپر براث باعث رشد سریع و تراکم بالای سلول‌های باکتریایی می‌شود، برای بررسی بیان ژن‌ها و تولید پروتئین‌های بازتولید شده در مقیاس بزرگ مورد استفاده قرار می‌گیرد. تحقیقات دارویی و واکسن: در صنایع داروسازی و تولید واکسن، سوپر براث می‌تواند برای تولید مقادیر زیادی از ترکیبات بیولوژیکی مورد نیاز، مانند پروتئین‌ها یا دیگر فرآورده‌های باکتریایی استفاده شود. آزمایش‌های فرمنتاسیون: در فرآیندهای فرمنتاسیون صنعتی، استفاده از سوپر براث می‌تواند به افزایش بازدهی تولید محصولات باکتریایی کمک کند. تحقیقات میکروبیولوژیکی: در زمینه‌های میکروبیولوژی و مطالعات اکولوژیکی، سوپر براث می‌تواند برای مطالعه رفتارهای رشد و متابولیسم میکروب‌ها استفاده شود.

• کشت سویه های E. coli‌‌ حاوی پلاسمیدهای با کپی بالا
• محیط کشت جهت افزایش میزان قابل استخراج DNA‌ پلاسمیدی
• محیط کشت جهت افزایش میزان قابل استخراج پروتئین های نوترکیب
• دارای منبع کربوهیدراتی بیشتر نسبت به TB

سوپر براث به دلیل داشتن محیطی غنی و توانایی پشتیبانی از رشد سریع و تراکم بالای سلولی، در بسیاری از آزمایش‌های بیوتکنولوژیکی و مولکولی کاربرد دارد.

ترکیب محیط براث کشت باکتری سوپر براث

سوپر براث یک محیط رشد باکتریایی بسیار مغذی است که برای کشت  باکتری‌ها استفاده می‌شود، این محیط  برای تولید مقادیر زیادی پروتئین نوترکیب مفید است. در ادامه به ترکیبات تشکیل دهنده محیط سوپر براث میپردازیم. تریپتون یا پپتون: منبعی از اسیدهای آمینه است که از کازئین (پروتئین شیر) یا سویا گرفته شده و یک ماده مغذی اصلی برای رشد باکتری‌ها است. عصاره مخمر: منبع غنی از ویتامین‌ها، مواد معدنی و سایر فاکتورهای رشد که باعث تحریک رشد باکتری‌ها می‌شود.

• KH2PO4: 3.8 g/L
• K2HPO4: 12.5 g/L
• Tryptone: 12 g/L
• Glycerol: 5 ml/L
• Yeast extract: 24 g/L

این ترکیب از مواد تشکیل‌دهنده محیط کشت Super Broth را به محیطی ایده‌آل برای حمایت از رشد کشت‌های باکتریایی در تراکم‌ بالا تبدیل می‌کند، که در بیان پروتئین هایی که نیاز به بازده بالایی از توده باکتریایی دارند، بسیار اهمیت دارد.

نحوه ارسال و نگهداری محیط کشت سوپر براث

• شرایط حمل و نقل: ارسال در شرایط عادی (بدون نیاز به یخ)
• شرایط نگهداری: ۲ الی ۸ درجه سانتی‌گراد (دمای یخچال)
• استریل شده توسط: فیلتراسیون و اتوکلاو
• زمان انقضاء: ۶ ماه پس از تولید مندرج روی محصول

خصوصیات فیزیکوشیمیایی محیط سوپر براث

• pH: میزان pH محیط سوپر براث به طور کلی در حدود ۷٫۰ تا ۷٫۵ تنظیم می‌شود. این محدوده برای رشد بیشتر باکتری ها، به ویژه برای کشت های E. coli بهینه است.
• حلالیت: اجزای محیط سوپر براث بسیار محلول در آب هستند این حلالیت پذیری اجزای محیط برای توزیع یکنواخت مواد مغذی و رشد موثر باکتری ها ضروری است.
• ظاهر محیط کشت: در حالت خشک، Super Broth به صورت پودر همگن دیده می‌شود. پس از تهیه محلول و استریل کردن، معمولاً به صورت محلولی شفاف تا کمی کدر در می‌آید.
• چگالی و ویسکوزیته: چگالی و ویسکوزیته محیط سوپر براث به دلیل افزایش محتوای مواد مغذی می تواند از براث های ساده بیشتر باشد که برای حمایت از رشد باکتری با تراکم بالا دارای اهمیت است.
• محتوای مغذی: محیط کشت باکتری سوپر براث غنی از مواد مغذی مانند نیتروژن و ویتامین‌ها است که از پپتون و عصاره مخمر تامین می‌شوند و محیطی غنی برای رشد باکتری‌ها فراهم می‌کنند.
• اسمولاریته: به دلیل محتوای آن، اسمولاریته Super Broth ممکن است از محیط‌های با غلظت کمتر، بیشتر باشد، که برای حفظ یکپارچگی سلول باکتریایی حیاتی است.
• پایداری در برابر استریلیزاسیون: محیط باکتری Super Broth هنگام استریل کردن در اتوکلاو پایدار باقی می‌ماند و مواد مغذی آن  توسط حرارت از بین نمی‌روند.