آنزیم RT (رونوشت بردار معکوس)، با عملکرد بسیار سریع و فعالیت بهینه در دمای بالا

آنزیم رونوشت بردار معکوس فعال در دمای بالای دنازیست آسیا (Thermostable M-MLV Reverse Transcriptase) برای رونوشت برداری معکوس و تهیه cDNA از انواع مولکول‌های کوتاه و بلند و با ساختارهای ساده و پیچیده RNA طراحی شده است.

این آنزیم تنها در ۱۰ دقیقه قادر به رونوشت برداری معکوس از مولکولهای RNA با طول ۱۰ هزار باز و بیشتر و سنتز cDNA می‌باشد. دمای ۵۵ درجه واکنش امکان آن را فراهم می‌سازد تا مولکولهای RNA با ساختار پیچیده و دارای ترکیب غنی از GC نیز بتوانند به راحتی مورد رونوشت برداری قرار بگیرند.

موارد استفاده از آنزیم RT:

در بسیاری از آزمایش ها لازم است تا اجزای واکنش تهیه DNA مکمل (cDNA) تغییر داده شده و بهینه شوند. برای مثال، مناسب‌ترین مقدار از مولکول RNA و آنزیم RT استفاده شوند و همچنین نوع پرایمر مورد استفاده نیز برای این واکنش تغییر داده شود تا بهترین نتیجه حاصل گردد؛ یعنی یک یا چند نوع از این پرایمرها برای آزمون و مقایسه استفاده شود:

• پرایمرهای Oligo dT
• پرایمرهای Random Hexamer
• پرایمرهای اختصاصی ژن شما (gene-specific)

در بعضی موارد ممکن است پرایمرهای gene-specific مناسب‌ترین گزینه برای واکنش مورد نظر شما باشند.

در چنین مواردی استفاده از آنزیم RT (این محصول) به استفاده از کیت سنتز cDNA حاوی پرایمرهای رندم هگزامر و کیت سنتز cDNA حاوی پرایمرهای oligo-dT ارجحیت خواهد داشت. اما اگر روش تهیه cDNA شما قبلا ستاپ شده باشد؛ استفاده از کیت‌های مذکور؛ علاوه بر سرعت و دقت بالا، دغدغه شما مبنی بر تهیه سایر اجزای واکنش سنتز cDNA را مرتفع می‌سازد.

نتیجه آزمایشات کنترل کیفی آنزیم RT

آزمایش‌ها و تست‌های کنترل کیفی صورت گرفته توسط بخش تحقیق و توسعه شرکت دنازیست آسیا نشان می‌دهد که انواع مولکول‌های RNA؛ از جمله کد کننده پروتئین، غیر کد کننده بلند (long noncoding RNAs) و مولکول‌های با تعداد کم رونوشت از منابع مختلف سلولی نیز با استفاده از این آنزیم قابلیت تبدیل به cDNA و سپس تکثیر توسط conventional PCR یا quantitative PCR را دارا می‌باشند.

این آنزیم در سه حجم ۵، ۲۵، و ۵۰ واکنشی ارائه می‌شود.

اجزای این محصول:

• آنزیم Thermostable M-MLV Reverse Transcriptase
• بافر واکنش 5x
• محلول 0.1 مولار DTT

به کیت آماده ساخت cDNA نیاز دارید؟

• کیت سنتز cDNA با پرایمر oligo-dT
  اجزای کیت: آنزیم RT؛ مخلوط dNTPs؛ پرایمر الیگو؛ آب فاقد ریبونوکلئاز.
• کیت سنتز cDNA با پرایمر رندم هگزامر
  اجزای کیت: آنزیم RT؛ مخلوط dNTPs؛ پرایمر Random Hexamer؛ آب فاقد ریبونوکلئاز.

انواع پرایمر‌های مورد نیاز برای سنتز cDNA

• پرایمرهای رندم اولیگو (Oligo dT-18)
  
• پرایمرهای رندم هگزامر (Random hexamer)