کیت استخراج Total RNA (روش غیرستونی)

کیت استخراج Total RNA (روش غیرستونی) دنازیست برای استخراج با کیفیت RNA توتال (تام) از انواع بافت‌ها و سلول‌های جانوری و گیاهی و میکروارگانیسم‌ها استفاده می‌شود. در این کیت، از ستون‌های سیلیکا استفاده نمی‌شود، بنابراین هزینه نهایی نسبت به سایر کیت‌ها (و محصولات مشابه خارجی) بسیار کمتر است. این کیت برای نمونه‌های آزمایشگاهی بسیار پرکاربرد است، زیرا هزینه تکرار آزمایشات را کاهش چشمگیری می‌دهد.

کیت استخراج Total RNA (روش غیرستونی) دنازیست، با استفاده از روش بهینه شده فنول-کلرفرم، امکان استخراج RNA با کیفیت بالا را از انواع نمونه ها فراهم می‌کند. روش فنول-کلرفرم، که یکی از روش‌های کلاسیک و معتبر در زمینه استخراج RNA به شمار می‌آید، به دلیل کارایی بالا و توانایی جداسازی دقیق RNA از سایر ترکیبات سلولی مانند DNA و پروتئین‌ها، بخاطر کیفیت و خلوص بالا در RNA استخراج شده نهایی، مورد اعتماد دانشمندان و محققان قرار گرفته است.

کیت استخراج Total RNA دنازیست با بهره‌گیری از خواص حلال‌های آلی، RNA را با خلوص و یکپارچگی بالا جدا می‌کند، که این امر برای آزمایشات پایین دست مانند NGS و RT-qPCR، مطالعات بیان ژن و … حیاتی است. استفاده از این روش در کیت استخراج Total RNA دنازیست، به آزمایشگاه‌ها، پژوهشگران و دانشجویان امکان می‌دهد تا RNA با بالاترین استانداردهای کیفی را برای تحقیقات و آزمایشات خود به دست آورند.

RNA استخراج شده توسط این کیت دنازیست، برای انواع کاربردهای بیولوژیکی مولکولی مورد آزمون کیفی و کمی قرار گرفته‌اند. این موارد عبارتند از:
RT-PCR, RT-qPCR, next-generation sequencing, microRNA isolation, and isolation of RNAs with low level of expression including lincRNAs and antisense lncRNAs

مزایای کیت استخراج RNA غیر ستونی دنازیست

• استخراج تمام RNA سلول (شامل miRNA ها)؛
• محصول نهایی (yield) بسیار بیشتر نسبت به کیت‌های ستونی؛
• مناسب برای نمونه‌های آزمایشگاهی (کیفیت بالا در کنار هزینه پایینِ تکرار آزمایشات،به دلیل عدم استفاده از ستون‌های سیلیکا).
• چندمنظورگی و گستره وسیع کاربرد: قابل استفاده برای انواع مختلف نمونه‌ها، از جمله بافت‌های جانوری و گیاهی.
• سازگاری با انواع آزمایشات پایین دست: مانند Next-Generation Sequencing (NGS), RT-qPCR و مطالعات بیان ژن و …
• کیفیت و دقت بالا: جداسازی موثر DNA از RNA در فرآیند استخراج، کیفیت و خلوص RNA نهایی را تضمین می‌کند، که برای دستیابی به نتایج دقیق در آزمایشات بسیار مهم است.

نکات قابل توجه در مورد کیت استخراج RNA غیر ستونی دنازیست

• نیاز به حداقل ۵۰ میلی‌گرم از بافت مورد نظر برای یک استخراج مناسب و با کیفیت؛
  (اگر میزان نمونه شما کمتر از این مقدار است از کیت استخراج RNA ستونی دنازیست استفاده کنید)
• مراحل طولانی‌تر و پیچیده‌تر نسبت به کیت‌های ستونی.

کیت استخراج Total RNA در چهار نوع ۵، ۲۵، ۵۰ و ۲۵۰ عددی در دسترس محققین و پژوهشگران گرامی قرار دارد.

کیفیت RNA استخراج شده با استفاده از کیت استخراج Total RNA (روش غیرستونی)

نمونه‌های کبد موش، طحال رت، کبد گاو استخراج شده با کیت استخراج Total RNA دنازیست

RNA استخراج شده نمونه‌های رویان جوجه، رده سلولی A549 با کیت استخراج Total RNA دنازیست

RNA استخراج شده به وسیله کیت دنازیست

نمونه‌های استخراج شده به وسیله کیت استخراج RNA دنازیست

کیفیت RNA نمونه‌های استخراج شده به وسیله کیت استخراج RNA دنازیست

کیفیت RNA نمونه‌های استخراج شده به وسیله کیت استخراج Total RNA دنازیست

محلول‌های موجود در کیت استخراج Total RNA به روش غیرستونی:

• محلول G1: باعث شکست دیواره سلولی، ممانعت از فعالیت ریبونوکلئازهای سلولی و تفکیک اسیدهای نوکلئیک RNA و DNA از یکدیگر و دیگر اجزای سلولی می‌شود.
• محلول G2: نمک های لازم برای رسوب RNA را فراهم می سازد.
• آب فاقد ریبونوکلئاز
  

پروتکل تصویری کیت استخراج Total RNA (روش ستونی) دنازیست. در این تصویر مراحل انجام استخراج RNA بصورت شماتیک نشان داده شده است.

۴ پارامتر (معیار) کلیدی که باید بعد از استخراج RNA بررسی شوند:

راهنمای عملی سنجش (آنالیز) کیفیت RNA استخراج شده

مراحل ترابل شوتینگ برای رفع مشکلات احتمالی RNA استخراج شده بوسیله کیت استخراج Total RNA (روش غیرستونی) دنازیست (جهت بزرگنمایی تصویر کلیک کنید).

سایر محلول‌هایی که برای استفاده از کیت استخراج Total RNA دنازیست نیاز دارید

محلول‌های عمومی که برای استفاده از کیت استخراج Total RNA دنازیست نیاز دارید عبارتند از:

• کلروفرم (Chloroform)
• ایزوپروپانول (Isopropanol a.k.a Isopropyl alcohol)
• اتانول (Ethanol)

DENAzist Total RNA isolation kit is composed of two unique solutions for isolation of RNA from a wide range of cells and tissues.

Using this kit, high quality RNA species can be isolated, which are immediately usable in a variety of downstream processes including:

• Next generation sequencing,
• RT-qPCR,
• Northern blotting,
• reverse transcription,
• nuclease protection assay,
• quantitative study of gene expression,
• and microarray experiments.

During the isolation process, DNA is actively separated from RNA, and thus, the resulting RNA will have a high degree of quality and purity.

S-1010-5      for 5 applications
S-1010         for 25 applications
S-1010-1     for 50 applications
S-1010-250 for 250 applications