محیط کشت سلول RPMI

محیط کشت سلول RPMI دنازیست در بسته بندی‌های ۱۰۰ و ۵۰۰ میلی‌لیتری عرضه می‌گردد و در کارهای تحقیقاتی به عنوان یک محیط پایه برای انجام کشت سلولهای یوکاریوتی مورد استفاده قرار می‌گیرد.

محیط کشت سلول RPMI (Roswell Park Memorial Institute) دنازیست که از پودر RPMI (از شرکت Gibco) تهیه شده است، یکی از محیط‌های پایه محبوب و متداول در کشت سلول‌های یوکاریوتی است. محیط کشت سلول RPMI دنازیست محیط حاوی L-گلوتامین است که برای بقای و رشد سلول‌ها ضروری است. همچنین ۲ گرم بر لیتر سدیم بیکربنات در این محیط کشت سلول وجود دارد که به عنوان بافر عمل کرده و به حفظ pH در محیط کشت کمک می‌کند.

ترکیبات مختلف این محیط کشت به گونه‌ای طراحی شده‌اند تا شرایط ایده‌آلی را برای رشد و تکثیر انواع مختلف سلول‌های یوکاریوتی فراهم آورند.

آزمون‌های کنترل کیفی دنازیست روی محیط کشت سلول RPMI

• ظاهر و رنگ محیط کشت: محیط کشت سلول RPMI دنازیست دارای رنگ قرمز روشن، و شفاف است که نشان‌دهنده وضعیت استاندارد و تازگی محیط کشت است.
• مقدار pH: میزان pH محیط کشت سلول RPMI در دمای محیط (۲۵ درجه سانتی‌گراد) در محدوده‌ای که بر روی برچسب محصول ذکر شده (۷ الی ۷٫۴) قرار دارد.
• استریل بودن: هیچ‌گونه رشد میکروبی یا قارچی پس از ۵ و ۱۰ روز انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی‌گراد مشاهده نشده است.
• روش استریل کردن: محیط کشت سلول RPMI با گلوکز بالای دنازیست، از طریق فیلتراسیون توسط فیلترهایی با اندازه منافذ ۰٫۲ میکرومتر استریل شده است.
• عملکرد رشد: کیفیت رشد این محیط کشت با کشت سلول‌های استوک مناسب آزمایش شده است.

تست پایداری محیط کشت‌های دنازیست

دانلود فایل pdf تست پایداری محیط‌کشت‌های دنازیست

تست پایداری (Stability Test) محیط کشت‌های دنازیست
(برای بزرگنمایی روی تصویر کلیک کنید)

روش استفاده از محیط کشت سلول RPMI دنازیست

در راستای بهره‌برداری موثر از محیط کشت سلول RPMI دنازیست، پژوهشگران گرامی باید اقدامات خاصی را برای آماده‌سازی محیط کشت قبل از استفاده انجام دهند. پس از خرید محیط کشت از وبسایت دنازیست (همین صفحه)، لازم است که سرم جنین گاوی (Fetal Bovine Serum یا FBS) را به آن اضافه کنند. FBS یک مکمل حیاتی است که حاوی فاکتورهای رشد و مواد مغذی لازم برای تقویت رشد و بقای سلول‌ها است. همچنین، افزودن آنتی‌بیوتیک‌های پنی‌سیلین/استرپتومایسین (پن/استرپ) به محیط کشت ضروری است تا از آلودگی‌های میکروبی و قارچی جلوگیری شود.

این آنتی‌بیوتیک‌ها با مهار گسترش باکتری‌ها و قارچ‌ها، محیطی سالم و استریل را برای سلول‌ها فراهم می‌کنند. توجه داشته باشید که میزان دقیق افزودن این مکمل‌ها و سایر مکمل‌های مورد نیاز پژوهش شما، باید بر اساس نیازهای خاص سلول‌هایی که کشت می‌شوند، و همچنین شرایط مورد نیاز آزمایش شما تعیین گردد. اطمینان حاصل کنید که تمامی مراحل آماده‌سازی و اضافه کردن مکمل‌های مختلف در شرایط استریل و با رعایت کامل اصول آزمایشگاهی صورت پذیرد تا بیشترین کارایی و اثربخشی محیط کشت حاصل گردد.

DENAzist Asia’s RPMI are supplied in 100 and 500 mL packages. This medium is for standard research applications and used as a basic medium for eukaryotic cell culture.