کیت استخراج DNA‌ ژنومیک گیاهی

کیت استخراج DNA‌ ژنومی گیاهی دنازیست برای استخراج DNA ژنومیک از بافت‌های گیاهی با سرعت و به سادگی طراحی شده است. با استفاده از کیت استخراج DNA‌ ژنومیک می‌توان تمام DNA ژنومی گیاه را در کوتاهترین زمان و با کیفیت بالا استخراج کرد. در این روش بعلت استفاده از ستون‌های سیلیکا، سرعت استخراج افزایش یافته است و دیگر نیازی به روش‌های طولانی استخراج مانند روش CTAB نیست.

DNA استخراج شده بوسیله کیت استخراج DNA می‌تواند در بسیاری از واکنش‌های پائین دست از جمله PCR، تعیین توالی، تعیین ژنوتایپ، و انواع هیبریدیزاسیون از جمله Southern blotting مورد استفاده قرار گیرد.

کیت استخراج DNA‌ ژنومی گیاهی در دو اندازه ۲۵ و ۵۰ عددی در اختیار پژوهشگران گرامی قرار دارد.

مزایای استفاده از کیت استخراج DNA ژنومی گیاهی

• استخراج DNA با کیفیت مطلوب با حداقل ۱۰ میلی‌گرم بافت ساییده شده با ازت؛
• بدون نیاز به انکوباسیون آنزیمی با پروتئیناز K؛
• میزان Yield بالا و مدت زمان استخراج کوتاه.

نکات قابل توجه در رابطه با کیت استخراج DNA‌ ژنومی گیاهی

• در بعضی از گیاهان دارویی به دلیل ترکیبات فنلی بالا باید مرحله شست و شوی ستون با بافر Wash حداقل دوبار انجام گیرد؛
• بعضی از سلول‌ها مثل بذر گندم دارای واکوئل بزرگی هستند و در کل تعداد سلول‌های کمی دارند. در نتیجه تعداد هسته‌ها نیز کم می‌باشد. در این موارد برای لیز شدن بهتر بافت، حجم بافر اولیه دو برابر و اگر تعداد سلول‌ها نیز در واحد حجم دو برابر شود، yield DNA استخراجی بالا می‌رود؛
• پلی‌ساکارید بالای گیاهان طی مراحل استخراج به حالت ژله ای در آمده که به عنوان inhibitor باعث بسته شدن ستون سیلیکا می‌شود. برای حل مشکل ترکیبی از NaCl و سیترات سدیم علاوه بر تغلیظ باعث حذف پلی ساکارید نیز می‌شود. در این موارد هم بهتر است جهت جلوگیری از آلودگی نمکی ستون را دو بار شست و شو دهیم؛
• این کیت برای استخراج DNA قارچ با روش غیرآنزیمی نیز می‌تواند استفاده شود. برای کیفیت بهتر باید میسلیوم قارچ در ازت مایع منجمد شده و مراحل لیز کردن بافت کمی طولانی‌تر می‌باشد.

محلول‌های موجود در کیت استخراج DNA ژنومی:

• محلول DG1: این محلول حاوی ترکیبات خاصی از نمک و دترجنت است که به شکستن دیواره سلولی کمک کرده و فرایند اتصال DNA به ستون سیلیکا را تسهیل می‌کند، موجب بهبود کیفیت استخراج می‌شود.
• محلول DG2: برای شستشوی ستون حاوی ِDNA کاربرد دارد.
• محلول DG3: برای شستشوی ستون حاوی ِDNA کاربرد دارد. در حین شستشو با این محلول DNA به طور متصل با ستون باقی می‌ماند.
• محلول DG4: برای آزادسازی و بازیابی DNA (یا اelution) از ستون استفاده می‌شود.

سایر محلول‌هایی که برای استفاده از کیت استخراج DNA‌ ژنومیک گیاهی دنازیست نیاز دارید

محلول‌های عمومی که برای استفاده از کیت استخراج DNA‌ ژنومیک گیاهی دنازیست نیاز دارید، عبارتند از:

• ۲-مرکاپتو اتانول (2Mercaptoethanol a.k.a 2ME)
• ایزوپروپانول (Isopropanol a.k.a Isopropyl alcohol)
• اتانول (Ethanol)

DENAzist Plant DNA isolation kit is designed for the extraction of genomic DNA from plant tissues. Using this kit it would be possible to extract genomic DNA with the highest quality in the least amount of time. The extracted DNA could be used in a multitude of downstream procedures including PCR, genotyping, sequencing, and different hybridization techniques including Southern blotting.

S-1030-5 for 5 applications
S-1030 for 25 applications
S-1030-1 for 50 applications